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双重PCR检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒和禽白血病病毒

作  者:
毕研丽;庄金秋;王金良;郭广君;吕素芳;苗立中;沈志强
单  位:
山东省滨州畜牧兽医研究院;山东绿都生物科技有限公司
关键词:
禽网状内皮组织增生症病毒;禽白血病病毒;PCR;检测
摘  要:
为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV),根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列和ALV P27基因序列,设计合成2对特异性引物。在建立各病毒单项PCR检测技术的基础上,优化反应条件,建立2种病毒的双重PCR检测方法。结果:可同时扩增REV的467 bp和ALV的675 bp的特异性片段,而对其他5种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该双重PCR技术能检出10 pg的ALV和10 pg的REV模板。用双重PCR技术与REV的间接免疫荧光法及ALV ELISA对245份疫苗株检测,进行同步比较,结果总符合率为100%。表明建立的双重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,对这2种外源病毒的同时检测,显示出了较好的可行性。

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