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Position: Home > Articles > Prokaryotic expression of Newcastle disease virus from goose F gene and development of an indirect ELISA Chinese Journal of Veterinary Science 2008,28 (12) 1383-1386

鹅源新城疫病毒F基因的原核表达及间接ELISA诊断方法的建立

作  者：
刘新鑫;孟轲音;尹仁福;丁壮
单  位：
吉林大学畜牧兽医学院;军事医学科学院军事兽医研究所
关键词：
鹅源新城疫病毒;F基因;原核表达;间接ELISA
摘  要：
参照GenBank公布的鹅源新城疫病毒NA-1株F基因(DQ659677)的核苷酸序列设计1对引物,通过PCR扩增F基因全长,将其克隆到pET-22b(+)载体中,构建了原核表达载体pET-22b(+)-F,转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化了重组蛋白,Western-blot证明该重组蛋白具有免疫原性。利用重组蛋白为包被抗原,通过方阵试验确定了包被抗原的最佳包被量为0.21μg/孔,建立了检测鹅源新城疫病毒抗体的间接ELISA诊断方法。
译  名：
Prokaryotic expression of Newcastle disease virus from goose F gene and development of an indirect ELISA
作  者：
LIU Xin-xin1,MENG Ke-yin2,YIN Ren-fu1,DING Zhuang1(1.College of Animal Science and Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun 130062,China;2.Institute of Military Veterinary,Academy of Military Medical Science,Changchun 130062,China)
关键词：
Newcastle disease virus from goose;F gene;prokaryotie expression;indirect ELISA
摘  要：
According to the F gene sequences of Newcastle disease virus from goose(DQ659677) available in GenBank,a pair of primers was designed for F gene of NDV from goose.Then the amplified product was cloned into prokaryotic expression vector pET-22b(+) and over-expressed in E.coli BL21(DE3).Western-blot analysis showed that the purified recombinant protein had good immunological activity.The optimal concentration of coated antigen F recombinant protein was 0.21 μg per well,which was determined by phalanx titrimetry.Then an indirect ELISA was established for detection of the antibody against Newcastle disease virus from goose.

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