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Position: Home > Articles > Expression and functional analysis of lncRNA63 and its co-expression gene Hr3 in Bombyx mori Acta Entomologica Sinica 2022,65 (5) 548-557

LncRNA63及其共表达基因Hr3在家蚕中的表达和功能分析

作  者:
王博;李苗苗;王景娅;胡晓玥;阚云超;乔惠丽
单  位:
南阳师范学院生命科学与农业工程学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室
关键词:
家蚕;长链非编码RNA;脂肪体;表达分析;变态发育
摘  要:
[目的]本研究旨在通过对一个新的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)及其共表达基因在家蚕Bombyxmori中的表达和功能进行分析,进一步阐明lncRNA在调控家蚕变态发育中的分子机制.[方法]基于前期家蚕脂肪体转录组测序数据,我们发现在蜕皮激素20E(2 μg/μL)处理5龄幼虫早期的脂肪体中lncRNA63表达显著上调,家蚕激素受体基因Hr3与之共表达.利用qRT-PCR对lncRNA63和Hr3在家蚕不同发育时期(4-5龄幼虫、蛹和成虫)、5龄幼虫不同组织(头、体壁、血淋巴、中肠、马氏管、脂肪体、丝腺、精巢和卵巢)和2 μg/μL 20E处理2,6,12和24 h后5龄幼虫脂肪体中的表达谱进行分析;采用核质分离检测和原位杂交技术检测lncRNA63在家蚕BmN细胞中的定位;利用dsRNA干涉家蚕5龄幼虫个体中lncRNA63的表达,并利用qRT-PCR检测RNA干涉lncRNA63对头、丝腺、脂肪体和体壁中Hr3表达的影响.[结果]qRT-PCR结果表明,1ncRNA63和Hr3在家蚕羽化前的蛹末期有一个表达高峰;二者在家蚕5龄幼虫头、体壁和丝腺中都有较高表达;lncRNA63和 Hr3在2 μg/μL 20E处理2,6和12 h的家蚕5龄幼虫脂肪体中较对照组(无水乙醇处理组)都显著上调,24 h下降到与对照组相当水平,二者的表达趋势完全一致.LncRNA63主要定位于BmN细胞核,但20E可诱导lncRNA63的核质迁移.利用dsRNA干涉lncRNA63表达后,Hr3的表达显著下调.[结论]20E不仅可调控lncRNA63的表达,还可诱导lncRNA63的核质迁移;lncRNA63可通过调控共表达基因Hr3的表达参与家蚕的变态发育过程.
译  名:
Expression and functional analysis of lncRNA63 and its co-expression gene Hr3 in Bombyx mori

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