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MTT法检测奶牛乳房炎无乳链球菌活菌数的研究

作  者:
马林玉;胡家银;林煊;陈鹤丹;谢颖;付文莉;杨君仪;刘丽娜
单  位:
贵州医科大学生物与工程学院生物与医学工程重点实验室贵州省免疫细胞与抗体工程研究中心医药生物技术工程研究中心
关键词:
奶牛乳房炎;无乳链球菌;MTT;活菌计数;
摘  要:
为建立一种准确、快速反映无乳链球菌活菌数的计数方法,以奶牛乳房炎致病菌中的无乳链球菌为研究对象,对MTT计数法中的最大吸收波长、MTT和DMSO最佳用量、无乳链球菌与MTT最适反应时间等影响因素进行了优化,并对MTT法与平板菌落计数法定量检测结果进行了比较。结果显示:MTT法测定无乳链球菌活菌数的最大吸收波长为570 nm,0.5 mg/mL MTT与100 μL无乳链球菌菌液反应的最佳反应量为45 μL,最适反应时间为3 h,溶解产物的DMSO最佳用量为125 μL;无乳链球菌活菌数在1.5×107~ 4.73×108 CFU/mL范围内时,MTT法与平板菌落计数法定量结果具有较好的线性关系(R2>0.99)。结果表明,本研究建立的MTT法可用于无乳链球菌活菌计数。

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