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Position: Home > Articles > Expression of hemagglutinin protein of H7N9 subtype avian influenza virus in baculovirus and evaluation of its immune efficacy Jiangsu Journal of Agricultural Sciences 2022,38 (1) 143-150

H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白在杆状病毒中的表达及其免疫效力评估

作  者:
郭晓琴;张谞霄;马诚太;欧杰;李柏林;李鑫
单  位:
勃林格殷格翰动物保健<中国>有限公司上海分公司;上海海洋大学食品学院
关键词:
H7N9亚型禽流感病毒;重组杆状病毒;血凝素;免疫原性
摘  要:
旨在利用杆状病毒表达系统构建1株对高致病性H7N9亚型禽流感病毒(A/Chicken/Huizhou/HZ-3/2016)攻击后的家禽提供保护的候选疫苗株.用同源重组的方法构建1株表达H7N9亚型禽流感病毒(A/chicken/Shaoxing/5201/2013株)血凝素(Hemagglutinin,HA)蛋白的重组杆状病毒.用PCR技术鉴定重组杆状病毒rBac-SX5201HA的遗传稳定性,用间接免疫荧光方法和Western Blotting方法鉴定HA蛋白的表达情况,用血凝试验检测HA蛋白的体外活性,继而对重组疫苗在无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)鸡上进行免疫效力试验,并对免疫后21 d的SPF鸡血清进行抗体检测,对攻毒5 d后的鸡咽喉和泄殖腔棉拭子进行病毒分离.结果显示,重组杆状病毒rBac-SX5201HA在昆虫细胞中生长良好,且可稳定高效表达H7 HA蛋白,血凝效价可达26;重组疫苗免疫SPF鸡21 d后可诱导28.4血凝抑制(Hemagglutinin inhibition,HI)抗体效价并能抵抗高致病性H7N9亚型禽流感病毒的攻击,免疫组SPF鸡群均未发病或死亡,仅有17%的SPF鸡在攻毒后第5 d出现排毒.可以看出,重组疫苗对高致病性H7N9亚型禽流感病毒攻击后的SPF鸡提供了100%的保护,且可有效抑制病毒在SPF鸡体内的复制.
译  名:
Expression of hemagglutinin protein of H7N9 subtype avian influenza virus in baculovirus and evaluation of its immune efficacy

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