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Position: Home > Articles > 造纸废水对斑马鱼DNA损伤的RAPD分析 Journal of Beijing Fisheries 2007 (4) 21-25

造纸废水对斑马鱼DNA损伤的RAPD分析

作  者:
范志平;马春燕;沈新强;路新平
单  位:
中国水产科学研究院东海水产研究所;上海水产大学
关键词:
造纸废水;斑马鱼;随机扩增DNA多态性;DNA损伤
摘  要:
采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对造纸废水造成的斑马鱼基因组DNA损伤进行检测。首先进行急性毒性试验,确定造纸废水96h-LC_(50)浓度为11.328%。从50条RAPD引物中筛选出20条对正常斑马鱼能稳定扩增且重复性好的引物用来检测。利用造纸废水(原浓度的3.8%)对斑马鱼染毒96h,随机提取染毒后6尾斑马鱼基因组DNA,用筛选的20条引物对其进行PCR扩增。用同样的引物对未染毒对照组的另外10尾斑马鱼基因组DNA进行分析,比较两组鱼的RAPD图谱,从而分析造纸废水对斑马鱼的致突变作用。20个引物中引物S_(112)可以检测出造纸废水染毒前后斑马鱼基因组DNA的差异。用引物S_(112),选取的对照组每个斑马鱼DNA的RAPD谱带均为8条亮带,随机抽取的染毒组20尾鱼中,每尾斑马鱼基因组DNA的RAPD谱带为5~7条,其中有20尾出现了713bp稳定条带的缺失,14尾出现了480bp稳定条带的缺失,7尾出现了1332bp稳定条带的缺失。这20尾鱼的RAPD图谱中的条带总数为120条,低于20尾对照组的条带总数(160条)。本文得出的结果显示了造纸废水对斑马鱼的基因组DNA损伤作用,同时验证了RAPD技术在检测造纸废水对水生动物基因组中的致突变作用的可行性。

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