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猪圆环病毒1型LAMP检测方法的建立及初步应用

作  者:
田瑶;李佳昕;杨莹;王硕;时建立;彭喆;李琛;徐绍建;吴晓燕;刘畅;韩红;李俊
单  位:
青岛农业大学动物医学院;山东省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词:
猪圆环病毒1型;环介导等温扩增技术;特异性;敏感性;
摘  要:
为建立猪圆环病毒1型(PCV1)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,为现场诊断提供技术支持,本试验根据GenBank公布的PCV1全基因组序列,在其保守区设计了4条特异性LAMP引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测,首次建立了PCV1的LAMP检测方法。结果表明,62℃水浴60 min为最佳反应条件;LAMP的检出限为1×101 copies/μL,普通PCR最低检测限为1×103 copies/μL;对猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)进行扩增,结果显示为阴性;应用该方法对103个临床疑似病料进行检测,阳性率为34.0%(35例),普通PCR阳性率为29.1%(30例),两种检测方法符合率为89.5%。本试验为PCV1临床检测提供了一种特异、快速、成本低廉的方法。

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