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当前位置: 首页 > 文章 > 猪肺炎支原体、猪圆环病毒2型和3型多重荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 动物医学进展 2023,44 (2) 8-14
Position: Home > Articles > Establishment and Preliminary Application of Multiplex Real-time PCR Detection Methods for Mhp,PCV2 and PCV3 Progress in Veterinary Medicine 2023,44 (2) 8-14

猪肺炎支原体、猪圆环病毒2型和3型多重荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

作  者：
肖婷;何颖;赵硕;蒋家霞;陈忠伟;郭旋;卢冰霞;林昌华;赵武;秦毅斌;段群棚;全琛宇;许心婷;陈婷婷;许艺兰;胡庭俊;张宁
单  位：
关键词：
猪肺炎支原体;猪圆环病毒2型;猪圆环病毒3型;多重荧光定量PCR
摘  要：
为建立一种快速、特异的猪肺炎支原体(Mhp)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的多重荧光定量PCR鉴别检测方法,根据Mhp、PCV2和PCV3及β-actin基因保守区域序列,设计合成4对特异性引物及4种荧光基团标记的TaqMan探针.构建含有各目的基因的重组质粒标准品,筛选引物,优化反应条件,成功建立多重荧光定量PCR后评价该方法的特异性、敏感性、重复性并将该方法初步应用于临床样品检测.结果显示,该方法能同时特异性地鉴别检测Mhp、PCV2和PCV3,检测PRRSV、CS-FV、PRV、JEV、PPV、PEDV、TGEV、FMDV病毒核酸无交叉反应;对Mhp、PCV2、PCV3和β-actin标准质粒的最小检出量分别为26.4、66.7、25.6、5990 copies/μL;该方法重复性好,组间和组内试验变异系数低于1.5%;用该方法检测101份临床样本,Mhp、PCV2和PCV3阳性率分别为20.8%、36.6%和33.7%.建立的多重荧光定量PCR方法能同时快速和定量检测Mhp、PCV2和PCV3,较普通PCR更敏感,实用性强,有效避免了多次检测耗时长、费用高的问题,为Mhp、PCV2和PCV3的监测和防控提供了可靠的检测技术.
译  名：
Establishment and Preliminary Application of Multiplex Real-time PCR Detection Methods for Mhp,PCV2 and PCV3

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