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Position: Home > Articles > Expression and function analysis of gly A gene of Methylocorus sp.MP 688 Journal of Zhejiang Agricultural Sciences 2018 (6) 1010-1014

Methylocorus sp.MP 688菌株glyA基因体外表达及功能研究

作  者:
孙宇桐;邹琪琪;孙菊鲜;孙晓宇;齐姗姗;辛琪;葛欣
单  位:
河北大学生命科学学院
关键词:
glyA基因;丝氨酸羟甲基转移酶;体外表达;双交换敲除
摘  要:
Methylocorus sp.MP 688菌株具有高产吡咯喹啉醌的特性而应用于工业生产当中。分析其全基因组及代谢通路,发现在C1固定中丝氨酸循环起到重要的生理作用。为了研究丝氨酸循环中gly A基因是否具有表达丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)活性及基因缺失是否会对菌株生命活动产生影响。采用体外表达方式,纯化并检测gly A基因产物SHMT酶是否具有催化活性。通过双交换实验进行glyA基因敲除,探究gly A基因缺失是否会对菌株产生影响。结果表明,gly A基因成功在体外表达,双交换敲除实验证明glyA基因作为关键基因存在,其缺失或可致死。此外,SHMT酶在35℃,pH值7.5缓冲体系中酶促效率最高,还原剂β-巯基乙醇对SHMT酶催化活性具有促进作用。
译  名:
Expression and function analysis of gly A gene of Methylocorus sp.MP 688
作  者:
SUN Yutong;

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