孙嘉伟;宋银;宋丹丹;张雪;黄娟;章云衡;黄瑾

石河子大学医学院;杭州师范大学医学部

miR-182-5p;Neuritin;阿尔茨海默病;生物信息学;

目的筛选阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）数据集中可能靶向Neuritin的目标miRNA,明确二者在AD动物模型中的相关性,进一步探讨目标miRNA对Neuritin的靶向抑制作用。方法从AD小鼠脑组织miRNA数据集中,富集AD中上调的miRNA;同时利用生物信息学手段,分析预测靶向Neuritin的miRNA;二者取交集,筛选获得AD中上调的可能靶向Neuritin的目标miRNA。为了明确二者的相关性,我们在AD模型小鼠中,使用qRT-PCR检测目标miRNA在脑组织的表达水平,同时利用Western Blot检测Neuritin蛋白在脑组织的表达。然后,在细胞水平观察了目标miRNA模拟物对Neuritin表达的影响。最后,我们用荧光素酶报告基因实验探讨了目标miRNA对Neuritn 3’UTR区特异性的结合作用。结果筛选获得AD中上调、且可能靶向Neuritin的目标miRNA——miR-182-5p;在AD模型小鼠海马组织中,miR-182-5p的表达升高（P<0.05）,且Neuritin的表达降低（P<0.01）,说明AD模型小鼠海马中miR-182-5p与Neuritin的表达呈负相关; miR-182-5p模拟物转染293T细胞后,Neuritin表达低于对照组（P<0.05）,说明miR-182-5p抑制了Neuritin的表达;荧光素酶报告基因结果显示,共转染荧光素酶报告基因和miR-182-5p模拟物后,p LUC-Neuritin组的荧光活性低于p LUC-MUT-Neuritin组（P<0.01）,说明miR-182-5p通过与Neuritn 3’UTR区特异结合,靶向抑制了Neuritin的表达。结论 AD模型小鼠中miR-182-5p表达升高,miR-182-5p可以靶向抑制Neuritin的表达。