中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会
Agricultural Information Institute of CAAS China Association of Agricultural Science Societies
En
Ch
中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 主办

AI检索

订阅

返回顶部
当前位置: 首页 > 文章 > 利用CRISPR/Cas9系统构建绿色荧光转基因斑马鱼 畜牧与兽医 2017 (6) 83-86
Position: Home > Articles > Construction of transgenic zebrafish expressing eGFP by CRISPR/Cas9 system Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2017 (6) 83-86

利用CRISPR/Cas9系统构建绿色荧光转基因斑马鱼

作  者：
刘斐斐;杨哲;杨祎擎;田净净;崔恒宓
单  位：
扬州大学动物科学与技术学院;扬州大学表观遗传学及表观基因组学研究所
关键词：
CRISPR/Cas9系统;斑马鱼;绿色荧光蛋白;同源重组
摘  要：
斑马鱼是研究人类疾病的重要动物模型,基因组定点编辑技术在利用斑马鱼研究同源基因功能方面提供了简便高效的途径。利用CRISPR/Cas9系统,在斑马鱼TU品系第5号染色体中选择靶位点,将Cas9 mRNA、靶位点识别的sgRNA和带有同源重组臂、利用短链肌球蛋白(Mylz2)启动子启动的绿色荧光蛋白(eGFP)基因显微注射到斑马鱼受精卵中,获得在该位点定点插入外源基因,并在肌肉中特异表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼。利用基因组DNA的PCR扩增,结合激发光下斑马鱼胚胎荧光表达情况,在存活的87尾幼鱼中发现其中45尾有荧光表达,同源重组率为51.724%。研究表明,利用CRISPR/Cas9系统成功定点插入外源基因,并获得在肌肉中特异性表达绿色荧光的斑马鱼。
译  名：
Construction of transgenic zebrafish expressing eGFP by CRISPR/Cas9 system
作  者：
LIU Feifei;YANG Zhe;YANG Yiqing;TIAN Jingjing;CUI Hengmi;College of Animal Science and Technology,Yangzhou University;Institute of Epigenetics and Epigenomics,Yangzhou University;
关键词：
CRISPR/Cas9;;zebrafish;;green fluorescent protein(eGFP);;homologous recombination
摘  要：
Zebrafish is an important animal model for studying human diseases. Gene editing is an important research tool for the improvement of animal breeds and the establishment of animal models of human diseases and gene editing provides a convenient and efficient way to study the functions of genes in zebrafish. Using the CRISPR/Cas9 system,Cas9 mRNA,a fragment containing homologous recombination arms and green fluorescent protein( EGFP) gene driven by short chain myosin( Mylz2) gene promoter and sgRNA,which targets to chromosome 5 of TU strain,were micro-injected into the zebrafish fertilized eggs. Transgenic zebrafish were identified by PCR of the genomic DNA accompanied with the observation of green fluorescent protein under microscopy. The results showed that 45 of 87 survival fish gained homologous recombination with a recombination rate of 51. 724%. The study indicated that a foreign eGFP gene was successfully inserted into zebrafish genome and was specifically expressed in the muscle using CRISPR/Cas9 system.

相似文章

导出引用
计量
文章访问数: 16
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊

友情链接Friendly link
农业信息研究所Agricultural information institute 农业智能知识服务平台Agricultural intelligent knowledge service platform 农业学术服务平台Agricultural Knowledge Service System 中国知网CNKI 维普网VIP 万方WANFANG DATA
联系我们Contact us

电话Tell：010-82109652-808

邮箱E-mail：agrijournal@caas.cn

服务Service
关于我们About us 意见建议Opinions and suggest
版权说明Copyright
单位：中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 © 2017中国农业科学院农业信息研究所 ICP备案号：京ICP备09089781号-46