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布鲁菌分泌蛋白BspG多克隆抗体的制备

作  者:
马忠臣;张超;李芮芮;王震;王勇;陈创夫
单  位:
石河子大学动物科技学院
关键词:
布鲁菌;BspG分泌蛋白;生物信息学分析;原核表达;多克隆抗体
摘  要:
为了获得一定纯度及浓度的布鲁菌分泌蛋白BspG,制备其多克隆抗体.首先通过生物信息学方法分析预测BspG蛋白序列特征及功能域;采用原核表达的方式获得BspG蛋白,纯化好的BspG蛋白混入弗氏佐剂后分4次免疫试验兔制备多克隆抗体;Western blot鉴定BspG蛋白免疫原性,方阵滴定法确定间接ELISA最佳抗原抗体工作浓度,进而评定BspG蛋白多克隆抗体效价.生物信息学方法分析出BspG蛋白含有7个抗原决定簇及多种B细胞抗原表位;成功纯化出BspG蛋白并制备出BspG蛋白多克隆抗体.Western blot验证BspG于HEK293T细胞中的表达,间接ELISA测定BspG多克隆抗体效价为1:3276800.原核表达获得布鲁菌BspG蛋白并制备出其多克隆抗体,为BspG后续的研究奠定了基础.
译  名:
Preparation of Polyclonal Antibody against Brucella Secreting Protein BspG

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