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当前位置: 首页 > 文章 > 产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体间接ELISA检测方法的建立 中国兽医科学 2009,39 (4) 333-337
Position: Home > Articles > Development of an indirect-ELISA for detecting specific antibody to F41 pilus protein of enterotoxigenic Escherichia coli Chinese Veterinary Science 2009,39 (4) 333-337

产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体间接ELISA检测方法的建立

作  者：
何晓杰;侯喜林;余丽芸;王桂华;刘建奎;魏春华
单  位：
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
关键词：
产肠毒素性大肠杆菌;重组F41菌毛蛋白;间接酶联免疫吸附试验
摘  要：
以纯化的重组F41菌毛蛋白作为检测抗原,建立了检测产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体的间接ELISA方法。经优化筛选的最佳反应条件:包被抗原浓度为0.26μg/孔,血清稀释度为1∶800,酶标二抗工作浓度为1∶6 000,30 g/L明胶封闭1 h,底物作用时间为10 min。经试验验证,该方法具有特异性好、敏感性高、重复性好、稳定性强等特点。用建立的间接ELISA方法与PCR方法进行符合性试验,总符合率为97.4%。表明,该方法可以用于产肠毒素大肠杆菌F41菌毛抗体的检测。
译  名：
Development of an indirect-ELISA for detecting specific antibody to F41 pilus protein of enterotoxigenic Escherichia coli
作  者：
HE Xiao-jie,HOU Xi-lin,YU Li-yun,WANG Gui-hua,LIU Jian-kui,WEI Chun-hua(College of Animal Science and Technology,Heilongjiang August-First Land Reclamation University,Daqing 163319,China)
关键词：
enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC);recombinant F41 pili protein;indirect ELISA
摘  要：
An indirect enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was developed based on a purified recombinant F41 pili protein of enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC).The optimum test conditions were as follows:the concentration of coating antigen was 0.26 μg per well,the dilution of serum and HRP-labeled mice anti-bovine IgG were 1∶800 and 1∶6 000,respectively,30 g/L gelatin blocked for 1 h,and the reaction time of coloration was 10 min.The specificity,sensitivity,reproducibility and stability were evaluated.Compared with antigen from PCR,97.4% agreement for positive and negative samples were obtained.The results indicated that the indirect ELISA could be used for detecting anti-F41 pili antibodies of ETEC.

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