作 者：
郭海龙;童光志;仇华吉;周艳君;兰文生;王云峰;吴东来
单 位：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室^中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室^中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室^中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室^中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室^中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室^中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001^黑龙江哈尔滨150001^黑龙江哈尔滨150001^黑龙江哈尔滨150001^黑龙江哈尔...
关键词：
猪IFN-γ;竞争PCR;内对照;嵌入光密度
摘 要：
运用RT-PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ-干扰素(IFN-γ)的部分片段,经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段,将余下的2个较大片段连接,并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物,从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMD18-T载体,重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定,验证无误后作为竞争性模板内对照,一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR,产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD),经校正后取上述两...
作 者：
郭海龙;;童光志;;仇华吉;;周艳君;;兰文生;;王云峰;;吴东来
单 位：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001;;黑龙江哈尔滨150001;;黑龙江哈尔滨150001;;黑龙江哈尔滨150001;;黑龙江哈尔...
