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基于纤突蛋白的鹅星状病毒间接ELISA检测方法的建立

作  者:
李清欣;张宇亮;曾杏梅;柴龙会;陈立志;张彦龙
单  位:
东北林业大学野生动物与自然保护地学院;中国农业科学院特产研究所
关键词:
鹅星状病毒;纤突蛋白;间接ELISA;
摘  要:
为用原核系统表达鹅星状病毒(GAstV)的纤突蛋白,并以该蛋白作为包被抗原,建立鹅星状病毒血清抗体的间接ELISA检测方法。首先将构建成功的鹅星状病毒纤突蛋白基因导入原核表达载体pCold-TF中,利用大肠杆菌BL21菌株进行重组蛋白的表达。表达、纯化后的抗原包被ELISA酶标板,4℃过夜包被,包被抗原浓度1μg/mL,经1%BSA 37℃封闭2 h,待检血清倍比稀释后37℃孵育1 h,HRP-兔抗鹅酶标抗体倍比稀释,37℃孵育1 h,避光显色20 min加终止液后酶标仪读板,经进一步条件优化,建立检测血清学鹅星状病毒抗体的间接ELISA方法。结果表明:建立的间接ELISA检测方法具有良好的特异性、灵敏性、重复性,可为开展鹅星状病毒血清流行病学调查和鉴定提供方法。

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