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牛诺如病毒、牛星状病毒和牛环曲病毒多重PCR检测方法的建立及应用

作  者:
师志海;徐照学;兰亚莉;张彬;孟红丽;王亚州;金磊;王文佳
单  位:
河南省农业科学院畜牧兽医研究所;河南牧业经济学院动物医药学院
关键词:
牛诺如病毒;牛星状病毒;牛环曲病毒;犊牛腹泻;多重PCR
摘  要:
为建立能同时检测牛诺如病毒(BNoV)、牛星状病毒(BAstV)和牛环曲病毒(BToV)的方法,根据BNoV、BAstV和BToV基因组的保守区域设计3对特异性引物,预期特异性扩增BNoV、BAstV和BToV的片段大小分别为542,376,698 bp,建立了BNoV、BAstV和BToV的多重PCR检测方法.结果显示,该方法能特异性扩增BNoV、BAstV和BToV的目的条带,且未扩增出其他犊牛腹泻病原;BNoV、BAstV和BToV的最低检测限分别为1.34*10~4,1.06*10~4,1.03*10~4拷贝/μL.对采集自河南省的221份犊牛腹泻样品的检测结果显示,BNoV、BAstV和BToV的检出率分别为9.96%(22/221),18.10%(40/221)和19.00%(42/221).三者与单一PCR检测结果相一致.结果表明,本试验建立的多重PCR方法可用于BNoV、BAstV和BToV的检测和流行病学调查.

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