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细胞色素CYP17a1基因在锦鲤性腺不同发育时期的表达分析

作  者:
史东杰;谭政;张强;伍仕弘;魏东;李文通;王赛赛;孙砚胜;姜巨峰
单  位:
天津农学院水产学院;北京市农林科学院水产科学研究所;北京市通州区动物疫病预防控制中心;天津市水产研究所暨天津市观赏鱼技术工程中心;北京雅仕锦鲤养殖技术有限公司
关键词:
锦鲤;CYP17a1;卵巢;精巢;表达;实时荧光定量PCR;
摘  要:
为探究CYP17a1基因在锦鲤(Cyprinus carpio)性腺不同发育时期的作用及其在不同组织中的表达水平,采用实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)技术,分析了细胞色素CYP17a1基因在1~3龄锦鲤成鱼性腺发育6个时期(Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ期、Ⅵ期),及精巢(卵巢)、脑、肌肉和肾脏等不同组织中CYP17a1 mRNA和蛋白质的表达情况。结果显示,1~3龄锦鲤雌鱼、雄鱼性腺发育不同时期成熟系数(GSI)变化规律基本相同,其中3龄锦鲤性腺Ⅴ期时最高,但卵巢GSI明显高于精巢。CYP17a1 mRNA在卵巢、精巢、脑、肌肉和肾脏都有表达,各组织表达量存在显著差异(P<0.05),表现为精巢>卵巢>肌肉>肾脏>脑,卵巢、精巢的表达量随着年龄增加有升高趋势,在脑、肌肉和肾脏中无明显年龄差别。CYP17a1基因在1~3龄锦鲤卵巢、精巢的6个不同发育时期表达量均值呈现先降低后升高趋势,并呈现出随年龄增长,表达量显著升高的现象。3龄锦鲤精巢Ⅰ期表达量最高,是同龄锦鲤精巢Ⅲ期和Ⅳ期表达量的2.75倍和3.13倍。Western blot检测结果显示,CYP17a1蛋白表达水平与mRNA表达水平一致。以上研究结果表明,细胞色素CYP17a1基因在锦鲤性腺发育中发挥着一定作用,可能在精巢发育及精子细胞分化成熟方面具有重要促进作用。

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