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非洲猪瘟病毒LAMP可视化快速检测方法的建立与应用

作  者:
王林;吴迪;高晓龙;张玮;张启龙;栗云鹏;韦海涛;周德刚;刘晓冬;宋彦军
单  位:
北京市动物疫病预防控制中心
关键词:
环介导等温扩增方法;非洲猪瘟病毒;现场快速检测;
摘  要:
旨在建立一种适用于现场快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的可视化环介导等温扩增(LAMP)方法。采用针对非洲猪瘟病毒的p72基因编码区序列,设计合成2组引物,对引物进行筛选和反应条件优化,确定敏感性与特异性,并与荧光定量PCR方法进行比较。结果:建立的LAMP方法在63℃5020min内对ASFV的检测灵敏度为1020copies/μL,与猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)均无交叉反应;利用该方法对300份送检的临床样品进行检测,检出阳性样品8份,与荧光定量PCR检测结果一致。综上表明,本研究建立的方法具有特异性好、灵敏度高、快速、结果可视、设备适用范围广等优点,适用于ASFV现场快速检测。

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