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苎麻ACC氧化酶基因(BnACO2)的克隆、时空表达及原核表达分析

作  者:
罗金凤;彭文仙;肖旭;薛丽君;邢虎成
单  位:
湖南农业大学苎麻研究所
关键词:
苎麻;ACC氧化酶;克隆;表达分析
摘  要:
ACC氧化酶(ACC oxidase,ACO)是乙烯合成途径中的一个关键酶.本研究通过RT-PCR结合RACE技术克隆得到一个ACO基因,命名为BnACO2,该基因cDNA序列全长为1 377 bp,开放阅读框为957 bp,编码318个氨基酸多肽,预测其分子量和等电点(pI)分别为36.145 kD和5.60.生物信息学分析表明,BnACO2编码蛋白没有信号肽和跨膜结构域,亚细胞定位于细胞质.与川桑等物种ACC氧化酶基因核苷酸序列同源性在83%以上,氨基酸序列同源性在87%以上.通过系统发育树发现该基因和山黄麻、大麻ACO基因亲缘关系最近.实时荧光定量PCR分析表明,苎麻BnACO2基因在苎麻各部位均有表达,特别是在雌花花芽中表达显著.最后成功构建原核表达载体pQE-BnACO2,诱导表达出的目的蛋白分子量大小约为36.15kD,与预测的蛋白大小一致.这为进一步研究BnACO2基因的功能提供了科学依据.
译  名:
Cloning,Spatio-temporal Expression and Prokaryotic Expression Analysis of ACC Oxidase Gene(BnA CO2)from Ramie

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