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利用密码子优化提高BtcrylAh基因在转基因玉米(ZeamaysL.)中的表达

作  者:
李圣彦;郎志宏;朱莉;李秀影;张杰;何康来;黄大昉
关键词:
crylAh基因;密码子优化;抗虫玉米
摘  要:
BtcrylAh基因是本实验室从苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BT8中克隆的一种新型杀虫蛋白基因.在前期工作中已根据植物密码子偏好性对crylAh基因进行过一次优化.根据玉米密码子偏好性对crylAh基因进行第二次优化,并将两次优化的crylAh基因分别构建了pAhmG和pmAhb植物表达载体,利用农杆菌介导法转化玉米自交系综31,分别得到10株和9株阳性转基因玉米植株.通过ELISA、Western blot检测及生物活性检测,比较不同优化的基因在玉米中的蛋白表达量及抗虫情况.初步结果表明外源基因在玉米植株中可以稳定表达并可以遗传.二次优化基因比一次优化基因在玉米中的蛋白表达量更高,抗虫性更好.表明密码子优化有利于提高外源基因的表达.

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