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免疫小鼠血清中猪圆环病毒2型抗体ELISA检测试剂盒的研究

作  者:
李建;张敏;薛霜;张飞雁;朱薇;石宝兰;漆世华;李文静;王碧群;秦红刚;韩兴;郑良益;徐松;舒银辉;冯钊;李婷婷;谢红玲
单  位:
国药集团动物保健股份有限公司
关键词:
猪圆环病毒2型;抗体;ELISA试剂盒;
摘  要:
为研制一种小鼠血清中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测试剂盒,以PCV2 Cap蛋白兔多抗作为包被用抗体,捕获纯化的PCV2 Cap蛋白,制备抗原检测板,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗小鼠IgG作为二抗,建立检测小鼠血清中PCV2抗体ELISA检测方法并制备试剂盒。采用所制备的ELISA试剂盒对50份已知阴性血清样本进行检测,临界OD450nm值为0.335;采用ELISA试剂盒与IFA分别对100份血清检测,总符合率为96%,检测小鼠血清敏感性效价达1∶16000,与其他常见的猪病毒小鼠阳性血清无交叉反应,2~8℃保存15个月稳定,批内变异系数为2.28%~4.17%,批间变异系数为4.27%~6.02%,具有良好的敏感性、特异性、稳定性及重复性;采用ELISA试剂盒对不同来源疫苗免疫组小鼠血清进行检测,均显示良好效果。研究表明,本研究制备的ELISA试剂盒可用于小鼠血清中PCV2抗体效价检测。

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