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用优化的切向流超滤法提高环境水中对虾白斑综合症病毒的浓度及检测效率

作  者:
张娜;刘荭;谢艳辉;黄磊;孙思阳;斯泽恩;李家侨
单  位:
湛江海关技术中心;南昌海关技术中心;深圳海关动植物检验检疫技术中心
关键词:
环境水样品;对虾;白斑综合症病毒;切向流超滤;数字PCR;
摘  要:
水是病毒传播的最重要途径之一,但是从水中检测病毒是一项挑战。由于水中的病毒滴度低,而且水的样品成分复杂,检测前通常需要进行水样品处理,浓缩水中的病毒以达到可检测的数量。本试验分析切向流超滤技术的关键参数(包括切向流的不同孔径、不同面积的超滤柱)以提高从水环境样品中浓缩对虾白斑综合症病毒的效率,并用荧光PCR和数字PCR来定量检测病毒浓缩效果。结果显示,浓缩白斑综合症病毒的过滤最佳过滤柱为0.2μm微过滤膜、UFP-100-C-4MA超滤柱(孔径100 kDa,面积为420 cm2)。在进行水样品倍比稀释后所构建的切向流超滤方法对白斑综合症病毒的平均浓缩回收率为73.92%,浓缩效果较好;且病毒回收重复性较高。因此,本试验所优化的切向流超滤方法可以有效地浓缩环境水中的虾病毒,提高水生病毒病原体的检测与流行病学调查的效率。
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