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黑山羊源大肠杆菌烈性噬菌体生物学特性及基因组分析

作  者:
于洋;王静;张娜;朱孟雨;朱仁君;高现荣;张针祥;王培坤
单  位:
临沂大学离退休工作处;临沂市兰山区畜牧发展促进中心;临沂大学微生物与宿主健康研究所
关键词:
黑山羊;大肠杆菌;烈性噬菌体;生物学特性;裂解谱;全基因组
摘  要:
为分离到能有效裂解黑山羊源大肠杆菌的烈性噬菌体,本课题采集不同来源的新鲜粪便样品并经目的 菌富集后,结合双层琼脂平板法进行噬菌体分离纯化,随后制作透射电镜样品进行其外形特征观察;对获得的噬菌体进行裂解谱、最佳感染复数和生长曲线分析;该噬菌体对温度、pH和紫外线的敏感性测定;该噬菌体全基因组测定与分析.结果 表明,从黑山羊粪便中分离出的一株烈性噬菌体PLYYY01,在大肠杆菌菌苔形成1~2mm的透亮噬菌斑;通过透射电镜观察,该噬菌体头部直径在60nm左右,尾部长度为100nm左右;该噬菌体有较宽的裂解谱(37.5%,6/16),可裂解多种血清型大肠杆菌;最佳感染复数是0.1;具有较强的繁殖活性,潜伏期约为30 min,爆发量约为95PFU/cell;在40℃ ~ 50℃、pH 5~ 10之间噬菌体的效价较为稳定,对紫外线不耐受;基因组测序组装结果显示:PLYYY01基因组长度为57025 bp,(G+C) mol%含量为44.74%,共编码71个蛋白,未发现抗生素耐药基因及毒力因子基因.

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