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Journal of China Agricultural University
2022,27
(1)
50-57
RNAi转基因大豆品系‘B5C9123-5’的RPA可视化检测技术
作 者：
张晨;雷展;李凯;李飞武;商颖;许文涛
单 位：
中国农业大学食品科学与营养工程学院/北京食品营养与人类健康高精尖创新中心;农业农村部农业转基因生物安全评价(食用)重点实验室;昆明理工大学农业与食品学院;吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
关键词：
RNAi转基因作物;重组酶聚合酶扩增;可视化检测;SYBR Green I
摘 要：
为开发RNAi转基因作物的田间可视化鉴定方法,以DNA嵌合染料SYBR Green I为材料,采用设置重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)特异性引物的手段,建立了一种快速、低成本、可视化的RPA用于转基因大豆‘B5C9123-5’的检测。结果表明,在靶标不存在时,RPA体系中游离的SYBR Green I染料使溶液呈现较弱的黄色荧光。在靶标存在的情况下,RPA扩增产生的双链DNA与SYBR Green I结合导致溶液从黄色转变为绿色并使荧光迅速增强。通过对RPA扩增时间和温度进行优化,阳性结果可在20min内用肉眼鉴别,检测限为1.00ng/μL。通过设置不同RPA引物,该方法可用于现场快速检测多种RNAi转基因作物。
译 名：
RPA visual detection technology for RNAi transgenic soybean‘B5C9123-5'
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