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禽致病性大肠杆菌clpV基因缺失株的构建及其对Ⅰ型菌毛主要基因表达的影响

作者：

钟昊然;王培莉;陈艳飞;孟霞;朱国强;李建基;崔璐莹;董俊升;王亨

单位：

扬州大学兽医学院

关键词：

Red同源重组系统;禽致病性大肠杆菌;Ⅵ型分泌系统;clpV基因;缺失株构建;Ⅰ型菌毛

摘要：

为研究禽致病性大肠杆菌(APEC)六型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS) clpV基因对Ⅰ型菌毛表达的影响,本研究利用Red同源重组系统构建了禽致病性大肠杆菌clpV基因缺失株TW-XM△clpV.将clpV基因克隆到表达载体pBR322中,构建相应回补株TW-XMC△clpV.通过PCR特异性检测和基因测序,验证上述突变株均构建成功,且能稳定遗传.利用荧光定量PCR检测野生株、clpV缺失株和回补株中Ⅰ型菌毛9个主要基因的mRNA相对表达量.结果显示:与野生株相比,缺失株中fimC、fimF、fimG、fimI的mRNA相对表达量显著下降,fimB、fimD、fimE极显著下降,fimA与fimH则无统计学意义;而回补株各基因的mRNA相对表达量均得到了恢复.本研究表明clpV基因缺失影响了I型菌毛的表达.本研究有助于了解T6SS与Ⅰ型菌毛合成的关系,为进一步研究APEC的致病机理奠定基础.

译名：

Construction of clpV deletion mutant of avian pathogenic Escherichia coli and the impact of clpV on expression of type I fimbriae

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