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Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences
2022,53
(5)
1632-1637
检测绵羊源爱知病毒D型荧光RT-PCR方法的建立和应用
作 者：
阿比克哈莫;余忠华;杨晨;景志忠;汤承
单 位：
阿坝藏族羌族自治州动物科学技术研究所;西南民族大学畜牧兽医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室
关键词：
绵羊源爱知病毒D型;荧光RT-PCR方法;绵羊;腹泻
摘 要：
绵羊源爱知病毒D型(ovine Aichivirus D)是在国内绵羊中新发现的病毒,本研究根据绵羊源Aichivirus D 3D基因序列设计检测引物,通过反应体系和条件优化,成功建立了检测绵羊源Aichivirus D的TB Green染料法荧光RT-PCR方法,该方法特异性和稳定性良好,灵敏度高.对2020年4月-2021年5月采集自四川6个场253份绵羊粪便样本(健康羊的133份,腹泻羊的120份)进行检测,结果该病毒的平均检出率为8.7%,场阳性率为66.7%.其中,腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(17.5%)显著高于非腹泻粪便样本中绵羊源Aichivirus D阳性率(0.75%,P<0.001).表明绵羊源Aichivirus D可能是引起以上地区绵羊腹泻的病原.从绵羊源Aichi-virus D 的阳性样本中成功克隆出大小为1 422 bp的13个完整的绵羊源Aichivirus D 3D基因,其核苷酸相似性为99.4%~100.0%.遗传演化分析发现这13株绵羊源Aichivirus D 3D基因与本实验室前期研究上传的绵羊源Ai-chivirus D 3D基因共同聚为单独的一个大支.本研究为绵羊源Aichivirus D的分子检测提供了一种新的方法和基础流行病学数据.
译 名：
Establishment and Application of a Fluorescent RT-PCR Assay for Detecting Ovine Aichivirus D
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