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T2毒素人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备

作者：

王坤;李清州;胡骁飞;李文君;孙亚宁;王方雨;职爱民;邓瑞广;张改平

单位：

河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室;河南科技大学食品与生物工程学院;河南省农业科学院农业经济与信息研究中心

关键词：

T2毒素;人工抗原;多抗血清;ELISA

摘要：

合成并鉴定T 2毒素人工抗原,通过动物免疫制备敏感性高、特异性好的鼠源T 2毒素多克隆抗血清。采用琥珀酸酐法将T 2毒素活化为T 2HS,T 2HS在碳二亚胺(EDC)作用下与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原T 2 BSA和检测抗原T 2OVA,经鉴定后,分别按30、50μg/只的剂量免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔4周,最后1次免疫10d后,断尾采血,制备多抗血清。利用间接ELISA方法测定抗血清效价,间接竞争ELISA测定其敏感性和特异性。结果表明,免疫的6只小鼠效价均达到了1∶104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,其半数抑制质量浓度(IC50)为324ng/mL,且具有良好的特异性。成功合成了T 2毒素人工抗原,制备了多克隆抗体血清,为T 2毒素单克隆抗体的制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。

译名：

Preparation of T-2 Toxin Artificial Antigen and Mouse Polyclonal Antiserum

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