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鸡PD-1及其配体实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

作  者:
孙国鹏;王爱国;李博文;岳锋;张艳芳
单  位:
河南科技学院动物科学学院;新乡学院生物技术研究中心生命科学与技术系河南科技学院动物科学学院;新乡学院生命科学与技术系
关键词:
鸡;程序性死亡因子-1(PD-1);PD-L1;PD-L2;实时荧光定量RT-PCR
摘  要:
为了建立并应用鸡相关免疫抑制性受体及其配体的检测方法,试验根据GenBank中程序性死亡因子-1(PD-1)及其配体PD-Ls(PD-L1、PD-L2)的基因序列分别设计特异性引物,建立这3种基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对鸡法氏囊病毒(IBDV)感染雏鸡7 d的外周血单核细胞(PBMC)中3种基因mRNA表达水平进行检测。结果表明:建立的检测方法在1×101~1×108copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,相关系数均大于0.990,重复性试验的组内及组间变异系数均小于3%;应用所建立的方法对临床样品进行检测,IBDV感染组PBMC中PD-1、PD-L1和PD-L2 mRNA表达量与对照组相比均显著升高(P<0.05)。说明所建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性。
译  名:
Establishment and application of real time RT-PCR method for detecting programmed death-1(PD-1) and its ligands in chickens

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