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双抗夹心酶免疫法检测转Bt基因抗虫棉种子的研究

作  者:
孙硕;张坤;谭桂玉;曹振;南铁贵;王保民
单  位:
中国农业大学农学与生物技术学院
关键词:
转Bt抗虫棉;双抗夹心酶免疫法;种子纯度;偶然基因改造成分混杂
摘  要:
应用中国农业大学化控中心筛选的抗Bt Cry1Ac蛋白鼠单克隆抗体和兔多克隆抗体,建立了Bt Cry1Ac蛋白的双抗夹心酶联免疫检测法(Sandwich ELISA)。该方法的检测范围为0.78~50.0 ng.g-1,线性回归方程y=0.6634x-1.7387,决定系数为0.992。该方法与国外商业化试剂盒检测结果完全一致,可用于转基因抗虫棉Bt毒蛋白定性和定量检测。采用所建立的方法对亲本之一为非转基因抗虫棉的杂交F1、F2种子进行检测,结果 F1全部为阳性,F2阴性和阳性数量比为1∶3,符合性状分离定律;此外,模拟检测种子的偶然基因改造成分混杂(Adventitious Presence,AP)检测结果为:对于Bt毒蛋白含量在140 ng以上的单粒种子,最低检测比例为1∶110。
译  名:
Determination of Bt Protein in Transgenic Cotton Seeds by Double Antibody Sandwich Enzyme-linked Immunosorbent Assay

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