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日本大耳白兔干扰素-γ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作  者:
任春芝;季燚;刘丹丹;李建梅;王尚尚;陶建平;王志强;许金俊
单  位:
扬州大学兽医学院;姜堰市畜牧兽医站
关键词:
日本大耳白兔;干扰素-γ;克隆;序列分析;表达
摘  要:
提取经ConA刺激后的日本大耳白兔外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR技术对其IFN-γ基因进行扩增和测序。将去除信号肽的IFN-γ基因片段插入原核表达载体pET-30a并在大肠杆菌中进行表达。结果显示,克隆的IFN-γ基因长为504个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码168个氨基酸,所测序列与GenBank中已登录的安哥拉兔、中国白兔、欧洲兔、新西兰兔IFN-γ同源性为100%,与獭兔同源性高达99.8%。构建的重组菌经过IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳证实,IFN-γ基因片段在大肠杆菌中得到了融合表达,分子质量约为18 ku,表达量为菌体总蛋白的35%左右。以上结果为下一阶段兔IFN-γ重组蛋白生物学特性及其应用的研究奠定了基础。
译  名:
Clone and Expression of IFN-γ Gene of Japanese White Rabbit in E.coli

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