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Biotechnology Bulletin
2012,28
(2)
69-74
大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建
作 者：
于海鹏;潘钰;蒙明明;李海英
单 位：
黑龙江大学生命科学学院黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室
关键词：
土著大豆根瘤菌;大豆血红蛋白基因lba DNA重组技术;工程菌株;三亲本杂交
摘 要：
以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列。利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba。采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)和SFH(pTR102)。盆栽试验发现,接种SFH(pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH(pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标。试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果。
译 名：
Construction of Genetic Engineering Strain of Introduction Glycine max Leghemoglobin Gene of lba into Native Rhizobium japonicum
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