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抗传染性支气管炎病毒S1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作  者:
李佳楠;杜林;周景明;祁艳华;马强;张改平;王爱萍
单  位:
东北林业大学生命科学学院;郑州大学生命科学学院
关键词:
传染性支气管炎病毒;S1蛋白;单克隆抗体;免疫过氧化酶单层试验;
摘  要:
选取传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus, IBV)M41毒株S1蛋白的重要抗原区,RT-PCR扩增选定的S1基因并构建pET-28a-S1重组表达载体,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE以及Western blot结果显示重组S1蛋白表达正确。以纯化的S1蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备并获得了抗IBV M41 S1蛋白的单克隆抗体3D9。免疫过氧化酶单层试验(immunoperoxidase monolayer assay, IPMA)结果显示,单克隆抗体3D9可与IBV M41毒株反应。成功表达了截短的IBV S1蛋白并获得了能识别IBV M41毒株的单克隆抗体,为IBV检测方法的建立奠定了基础。

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