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China Animal Husbandry & Veterinary Medicine
2014,41
(2)
39-42
京海黄鸡钠氢离子交换泵1基因实时荧光定量PCR标准曲线的建立
作 者:
陈学森;王金玉;张跟喜;张涛;唐莹;施会强
单 位:
江苏省京海禽业集团;江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室
关键词:
钠氢离子交换泵1;京海黄鸡;重组质粒;表达;实时荧光定量PCR
摘 要:
为阐明钠氢离子交换泵1(Na+/H+exchanger 1,NHE1)基因在京海黄鸡组织表达和生理功能,依据GenBank登录的NHE1基因的核苷酸序列(登录号:DQ256198)设计特异性引物,经RT-PCR技术从京海黄鸡组织样中扩增和克隆了上述因子的204bp核苷酸片段。测序鉴定后,将重组质粒10倍系列稀释后作为标准模板,通过实时荧光定量PCR方法,建立了它们各自的标准曲线及直线回归方程,得到了相关系数R2=0.9903、回归方程为y=-3.4643x+35.9000的标准曲线,成功构建了NHE1基因的标准质粒和标准曲线,为京海黄鸡组织中NHE1mRNA水平的定量检测提供了必要的技术手段。
译 名:
Establishment of Standard Curves for Detection of Na~+/H~+ Exchanger 1 Gene in Jinghai Yellow Chicken Using Real-time PCR