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蛇莓RAPD与ISSR-PCR反应体系优化

作  者:
张聪子;童巧珍;郭婷;高昱;蔡嘉洛
单  位:
湖南中医药大学
关键词:
蛇莓;RAPD-PCR;ISSR-PCR;单因素;正交设计;体系优化
摘  要:
采用单因素试验结合正交试验,对PCR反应体系中的5种主要反应因子Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA浓度进行优化筛选,确立了适合蛇莓基因组DNA的RAPD和ISSR反应体系,RAPD反应体系(20μL):Mg2+1.5 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶1 U、引物0.2μmol/L、DNA模板60 ng;ISSR反应体系(20μL):Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 250μmol/L、Taq酶0.5 U、引物1μmol/L、DNA模板60 ng。利用确立的体系对24份蛇莓种质进行扩增,结果条带清晰明亮,多态性好。

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