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油楠基因组DNA提取·ISSR反应体系优化及引物筛选

作  者:
吴忠锋;杨锦昌;尹光天;李荣生;邹文涛;袁洁
单  位:
中国林业科学研究院热带林业研究所;广州市林业和园林科学研究院
关键词:
油楠;DNA提取;ISSR-PCR;优化
摘  要:
[目的]对油楠基因组DNA提取、ISSR反应体系优化及引物筛选进行探讨。[方法]运用改良CTAB法对油楠树皮进行基因组DNA提取,利用单因素试验,对油楠ISSR-PCR反应各因素水平进行优化。[结果]运用改良CTAB法对油楠树皮进行基因组DNA提取效果最佳;最优体系:20μl反应体系中,模板用量20 ng,引物浓度0.6μmol/L,d NTPs浓度0.2 mmol/L,Mg2+浓度2.0 mmol/L,Taq酶用量1.5 U,10倍反应缓冲液2μl,dd H2O补至20μl;以该体系为基础进行引物筛选,在100条ISSR随机引物中筛选出13条多态性较高、扩增条带清晰、重复性好的引物。[结论]该研究丰富了油楠遗传学基本资料,为油楠遗传多样性研究奠定基础。
译  名:
DNA Extraction,Optimization of ISSR-PCR System and Primers Screening of Sindora glabra

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