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Position: Home > Articles > Detection of TIMP-1 Targeted siRNA Transfection Efficiency in Hepatic Stellate Cell Journal of Shihezi University(Natural Science) 2010,28 (4)

金属蛋白酶组织抑制因子-1小干扰RNA转染肝星状细胞效率的检测

作  者:
火睿;郑勇;田书信;周婷;孙侃;常向云
单  位:
石河子大学医学院第一附属医院
关键词:
RNA干扰;肝星状细胞;基因转染;转染效率
摘  要:
为提高TIMP-1 pGCsi-U6/shRNA真核表达载体在大鼠肝星状细胞HSC-T6中的转染效率,采用阳离子脂质体介导法将TIMP-1 pGCsi-U6/shRNA质粒转染入HSC-T6细胞,实验按质粒DNA和阳离子脂质体LipofectamineTM2000的不同比例分为5组:2 μg/0 μL、2 μg/4 μL、2 μg/6 μL、2 μg/8 μL、2 μg/10 μL,设空白对照组.转染48 h后,采用激光共聚焦显微镜观察各组转染情况,以流式细胞仪计算转染效率.激光共聚焦显微镜观察和流式细胞仪检测结果均表明质粒与脂质体比例为2 μg/8 μL组转染效率显著高于其余各比例组,其差异具有统计学意义.按照合适的质粒和脂质体比例, 质粒TIMP-1 pGCsi-U6/shRNA转染HSC-T6的效率可以达到37%, 这说明转染效率与脂质体和质粒的比例有关,质粒TIMP-1 pGCsi-U6/shRNA是转染HSC-T6较为理想的瞬时表达载体.
译  名:
Detection of TIMP-1 Targeted siRNA Transfection Efficiency in Hepatic Stellate Cell

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