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当前位置: 首页 > 文章 > 抗猫细小病毒嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达与鉴定 中国预防兽医学报 2019 (6) 632-636
Position: Home > Articles > 抗猫细小病毒嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达与鉴定 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine 2019 (6) 632-636

抗猫细小病毒嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

作  者：
薛雨佳;宋彩玲;赵爽爽;李彤彤;王文静;张云;刘明
单  位：
兽医生物技术国家重点实验室
关键词：
基因工程嵌合抗体;猫细小病毒;昆虫杆状病毒表达系统
摘  要：
为降低单克隆抗体(MAb)在犬体内的免疫原性,本研究克隆了具有中和猫、犬细小病毒(FPV、CPV)活性的MAb (3EB)的轻、重链可变区基因及犬天然抗体(NAb)轻、重链恒定区基因,通过融合PCR获得鼠-犬嵌合抗体基因.构建能够表达嵌合抗体的重组质粒,经昆虫杆状病毒表达系统对重组嵌合抗体进行表达.SDS-PAGE和western blot试验显示鼠-犬嵌合抗体重链为55 ku、轻链为25 ku.间接免疫荧光试验显示该嵌合抗体能够与抗犬IgG和FPV特异性结合.上述结果表明,嵌合抗体保留了原MAb 3EB对病毒特异结合能力的基础上,将鼠源恒定区替换为犬源NAb的恒定区.病毒中和试验表明嵌合抗体保留了3EB对FPV、CPV的中和活性.本研究首次通过昆虫杆状病毒表达系统表达了抗FPV、CPV的嵌合抗体,降低了原MAb的免疫原性,对FPV、CPV病临床治疗用抗体药物的研制具有重要指导意义.

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