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4种海水鱼线粒体DNA大片段的PCR-RFLP分析

作  者:
王强;刘芳;赫崇波;木云雷;王丽梅;尚德静
单  位:
辽宁师范大学生命科学学院;辽宁省海洋水产科学研究院辽宁省应用海洋生物技术开放实验室辽宁省海洋水产分子生物学重点实验室辽宁
关键词:
圆斑星鲽;高眼鲽;大菱鲆;真鲷;线粒体DNA;限制酶;PCR-RFLP
摘  要:
用蛋白酶k酚氯抽提法从圆斑星鲽、高眼鲽、大菱鲆和真鲷4种海水鱼的肌肉组织中提取基因组DNA,根据金枪鱼、牙鲆及相关鱼类的线粒体DNA(m tDNA)序列保守片断设计出扩增引物,扩增从16SrRNA到ND4之间约9400 bp的m tDNA长片段。用10种限制性内切酶(H inf I,H ind III,EcoR V,EcoT22 I,Mun I,EcoT14 I,Apa I,B ln I,Ava II,D ra I)对扩增得到的m tDNA长片段进行限制性酶切和分析,其中8种酶有酶切位点。利用Ne i-L i的片断法计算出单倍型的片断共享度,根据片断共享度计算出4种鱼之间的遗传距离,用M ega 3.1软件构建NJ系统关系树,同时探讨利用线粒体大片断PCR-RFLP方法进行鱼类系统发生研究的特点。
译  名:
Analysis of Long mtDNA Fragments from Four Marine Fishes by PCR-RFLP

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