孟祯;孙梦珂;许永得;秦韬;任喆

福建农林大学福建省兽医中药与动物保健重点实验室

余甘子多糖;结构表征;新城疫疫苗;免疫佐剂;

本试验旨在制备余甘子多糖（Phyllanthus emblica polysaccharide, PEP）,通过对其结构表征进行分析,探索PEP对鸡新城疫（Newcastle disease, ND）疫苗免疫效果的影响。利用紫外光谱（ultraviolet spectroscopy, UV）、红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy, FT-IR）、高效液相色谱分析法（high performance liquid chromatography, HPLC）和扫描电镜（scanning electron microscope, SEM）分析PEP结构;选取175只1日龄河田鸡,随机分成5组,每组35只,分别为空白对照组,疫苗对照组,PEP低、中、高剂量组。除空白对照组外均用ND疫苗进行免疫,7日龄首免,并于28日龄二免。在免疫的同时,PEP低、中、高剂量组分别按照10、20、30 g·L^-1的剂量给药PEP溶液0.5 mL,疫苗对照组和空白对照组给予等量生理盐水,每天1次,连续3 d。分别于7、14、21、28、35、42和49日龄时,测定血清中新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）特异性抗体水平以及γ-干扰素（INF-γ）和白介素4（IL-4）的水平;于28和49日龄时测定外周血淋巴细胞增殖活性和T淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺的比值;于49日龄剖杀后采集脾、法氏囊、胸腺和肝进行组织学观察以及检测免疫器官指数。结果表明,PEP为白色棉絮状,糖含量为（86.70±1.05）%,结构分析结果表明,PEP是含α型糖苷键的多糖,其组分均一,不含核酸和蛋白质,呈片状分布,总体结构规整且致密,单糖组成为葡萄糖醛酸（glucuronic acid, GlcA）、葡萄糖（glucose, Glu）、木糖（xylose, Xyl）和岩藻糖（fucose, Fuc）,其摩尔比为0.5∶8.3∶1.8∶0.3。动物试验结果表明,PEP能显著提高鸡血清中NDV特异性抗体、INF-γ和IL-4的水平（P<0.05）,还能显著促进鸡外周血淋巴细胞增殖和T淋巴细胞CD4⁺/CD8⁺的比值（P<0.05）,提高免疫器官指数（P<0.05）,激活脾、法氏囊、胸腺和肝等器官的免疫功能。PEP糖含量高,结构稳定,可提高机体免疫活性,具有较良好的佐剂活性,对ND具有良好的防治效果。