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Position: Home > Articles > Optimization of RAPD-PCR Reaction Conditions for Sweet Potato Hubei Agricultural Sciences 2009,48 (10) 2343-2346

甘薯RAPD-PCR反应条件的优化

作  者:
雷剑;杨新笋
单  位:
湖北省农业科学院粮食作物研究所
关键词:
甘薯;RAPD-PCR;反应条件;优化
摘  要:
以徐薯22的基因组DNA作为PCR反应模板,以随机引物进行RAPD-PCR反应,通过设置TaqDNA聚合酶加量、MgCl2浓度、dNTPs浓度、模板DNA加量、引物加量的不同梯度,探索出一套适合甘薯RAPD-PCR的最优反应条件。试验结果表明,最优反应条件为反应体系25.0μL,2.5μL的PCR 10×Buffer、0.15U的Taq DNA聚合酶、3.0 nmol·μL-1的MgCl2、0.6 nmol·μL-1的dNTPs、40 ng的DNA模板、40 ng的RAPD引物。
译  名:
Optimization of RAPD-PCR Reaction Conditions for Sweet Potato
作  者:
LEI Jian,YANG Xin-sun(Food Crops Institute,Hubei Academy of Agricultural Sciences,Wuhan 430064,China)
关键词:
sweet potato;RAPD-PCR;reaction condition;optimization
摘  要:
In this paper,CTAB method was used to extract genomic DNA from sweet potato Xushu No.22.High purity DNA was selected as DNA template.Use random primers to run RAPD-PCR reaction.Through setting a gradient concentrations of the Taq DNA polymerase,MgCl2,dNTPs,DNA template and primers,the suitable conditions for RAPD-PCR reaction of sweet potato was obtained: 25.0 μL reaction system which contains 2.5 μL PCR 10×Buffer,0.15U Taq DNA polymerase;3.0 nmol·μL-1 MgCl2;0.6 nmol·μL-1 dNTPs;40 ng DNA template and 40 ng primer.

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