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棉花GhUGT75L6的生物信息学分析及功能验证

作  者:
王心蕾;陆许可;陈修贵;王俊娟;王德龙;王帅;郭丽雪;陈超;叶武威
单  位:
中国农业科学院棉花研究所棉花生物学国家重点实验室农业部棉花遗传改良重点开放实验室
关键词:
陆地棉;糖基转移酶;生物信息学分析;转基因拟南芥;
摘  要:
糖基转移酶(glycosyltransferases,20GT;20EC202.4.x.y)是植物体内催化糖基化的主要酶,在催化次生代谢物合成、调节激素平衡以及参与植物非生物胁迫等方面发挥着重要的作用。为了更好地探究棉花中糖基转移酶的结构与功能,本研究通过生物信息学分析初步探究了GhUGT75L6基因编码蛋白的理化性质、二级结构、三级结构。采用实时荧光定量技术检测了GhUGT75L6基因在棉花中的表达情况。从棉花中克隆糖基转移酶基因GhUGT75L6,并将构建的过表达载体pBI121-GhUGT75L6转入拟南芥,对转基因拟南芥T3代种子进行功能验证。结果表明GhUGT75L6编码的蛋白分子量为52.62420kD,不含跨膜结构域,具备糖基转移酶所特有的UDP-glycosyltransferases标签,是一种非分泌型亲水蛋白。qRT-PCR分析结果表明,棉花中GhUGT75L6的相对表达量在根中最高,茎部其次,叶中最低。使用2520mmol/L20Na2CO3对转基因植株进行胁迫处理,发现野生型植株萎蔫程度更高,表明转基因植株的耐碱性得到了提高,GhUGT75L6参与了棉花抗逆的过程。

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