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Position: Home > Articles > Construction and Application of a Reference Plasmid Suitable for Determination of CpTI and crylA Gene Dosages in Genetically Modified Cottons Acta Agronomica Sinica 2011,37 (9) 1533-1539

一种适合转基因棉CpTI和crylA基因剂量测定的标准质粒的构建和应用

作  者:
苏长青;谢家建;孙爻;彭于发
单  位:
植物病虫害生物学国家重点实验室
关键词:
抗虫棉;CpTI基因;crylA基因;基因特异性实时PCR;标准质粒
摘  要:
在转基因检测领域,标准质粒以容易获得、纯度高、成本低和稳定性好的优点逐渐被广泛应用,适合同时检测多个靶标基因的需求.本研究针对我国抗虫棉(Gossypium hirsutum L.)的主要外源基因类型,构建含有豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI)、苏云金杆菌晶体杀虫蛋白基因(crylA)和棉花内标准基因硬脂酰-酰基载体蛋白脱饱和酶基因(Sadl)的多靶标质粒pMD-CCS作为标准物质,建立了CpTI和crylA基因的实时荧光定量PCR方法.测定了我国9个抗虫棉品种中的CpPT和cryIA基因剂量,显示科棉3号等3个抗虫棉品种中CpTI基因的平均剂量为0.020~0.018拷贝/基因组,crylA基因的平均剂量为1.377~2.136拷贝/基因组;鄂杂棉1号F1等6个抗虫棉品种中crylA基因的平均剂量为0.887~2.564拷贝/基因组,定量结果的标准差(SD)范围在0.001~0.149之间.结果说明,pMD-CCS适合作为标准物质用于抗虫棉中CpTI和crylA基因的定量测定.
译  名:
Construction and Application of a Reference Plasmid Suitable for Determination of CpTI and crylA Gene Dosages in Genetically Modified Cottons

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