中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会
Agricultural Information Institute of CAAS China Association of Agricultural Science Societies
En
Ch
中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 主办

AI检索

订阅

返回顶部
当前位置: 首页 > 文章 > 适体SELEX筛选中单链DNA的制备 江苏农业学报 2011,27 (5) 1133-1136
Position: Home > Articles > Preparation of single-stranded DNA in screening aptamer by systematic evolution of ligand by exponential enrichment(SELEX) Jiangsu Journal of Agricultural Sciences 2011,27 (5) 1133-1136

适体SELEX筛选中单链DNA的制备

作  者：
王丽;贺江;王耘;雷兆静;屠康;刘贤进
单  位：
南京农业大学食品科技院;安徽科技学院;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所农业部食品质量安全监控重点开放实验室
关键词：
适体;SELEX;双链DNA;单链DNA
摘  要：
探讨建立适体SELEX筛选中单链DNA(ssDNA)的制备方法,生成适体筛选的次级库,为适体SELEX筛选奠定基础。将PCR扩增后带生物素标记的双链DNA(dsDNA)连接在链霉亲和素标记的凝胶上,用NaOH变性解链制备ssDNA。利用荧光法分析dsDNA与凝胶结合所需的时间及NaOH对生物素与链霉亲和素标记凝胶结合的影响,在优化的试验条件下制备ssDNA,用琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳对其产物进行鉴定。结果显示:生物素标记的dsDNA与链霉亲和素标记的凝胶结合的时间以40 min为佳,0.01 mol/L、0.10 mol/L和1.00 mol/L的NaOH均不影响生物素与链霉亲和素标记凝胶的结合;在优化试验条件下制备的产物为ssDNA。表明采用上述方法制备ssDNA,操作简单、方便,所需时间短,适用于适体SELEX筛选中次级库的生成。
译  名：
Preparation of single-stranded DNA in screening aptamer by systematic evolution of ligand by exponential enrichment(SELEX)
作  者：
WANG Li1,2,3,HE Jiang2,WANG Yun2,LEI Zhao-jing2,3,TU Kang3,LIU Xian-jin2(1.Anhui Science and Technology University,Fengyang 233100,China;2.Key Laboratory of Food Safety Monitoring and Management,Ministry of Agriculture,Institute of Food Quality Safety and Detection,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences,Nanjing 210014,China;3.College of Food Science and Technology,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)
关键词：
aptamer;systematic evolution of ligand by exponential enrichment;dsDNA;ssDNA
摘  要：
This study aimed to find a easy way to prepare ssDNA and therefore lay a foundation for the construction of secondary ssDNA library for aptamer screening by systematic evolution of ligand by exponential enrichment(SELEX).PCR technique was employed,and SDS-PAGE analysis was applied to identify the product.The results showed that the optimized binding time of the double stranded DNA labeled with biotin and gel labeled with streptavidin were 40 min,and the binding of biotin and gel was independant of the concentration of NaOH.SDS-PAGE revealed that the product prepared under optimized condition was ssDNA.

相似文章

导出引用
计量
文章访问数: 10
HTML全文浏览量: 0
PDF下载量: 0

所属期刊

推荐期刊

友情链接Friendly link
农业信息研究所Agricultural information institute 农业智能知识服务平台Agricultural intelligent knowledge service platform 农业学术服务平台Agricultural Knowledge Service System 中国知网CNKI 维普网VIP 万方WANFANG DATA
联系我们Contact us

电话Tell：010-82109652-808

邮箱E-mail：agrijournal@caas.cn

服务Service
关于我们About us 意见建议Opinions and suggest
版权说明Copyright
单位：中国农业科学院农业信息研究所 中国农学会 © 2017中国农业科学院农业信息研究所 ICP备案号：京ICP备09089781号-46