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甘蓝型油菜△^12-油酸去饱和酶基因RNAi载体的构建

作  者:
梁会娟;苗丽娟;曹刚强;田保明;陈占宽
单  位:
郑州大学生命科学学院
关键词:
油菜;油酸;fad2;RNAi;载体构建
摘  要:
通过基因工程手段抑制甘蓝型油菜△^12-油酸去饱和酶(delta-12 oleate desaturase FAD2)基因的表达,从而使油酸脱饱和产生亚油酸的步骤受阻,达到富集油酸,减少多不饱和脂肪酸含量的最终目的.依据植物RNA干扰的原理和研究中用于构建RNAi载体的基本经验,选择油菜fad2基因片段(510bp)分别以反向和正向的形式插入到油菜napin启动子下游,并在反向和正向插入的基因片段之间即间隔区导入1个来源于豌豆的rbcS-3C基因内含子(83bp)及其剪切位点之前5bp、之后4bp片段.组装完成的fad2 RNAi载体转入到植物双元表达载体pCAMBIA3301,植物筛选标记基因采用抗灭生性除草剂PPT的选择基因bar及报告基因gus,从而构建成以甘蓝型油菜fad2基因为靶标的RNAi植物表达载体pCAMBIA3301-fad2i.

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