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Position: Home > Articles > Cloning and Expression of the vasa Gene in the Octopus sinensis Progress in Fishery Sciences 2022,43 (3) 118-128

中华蛸vasa基因的克隆及表达分析

作者：

刘宇岩;李凤辉;边力;朱文静;陈四清;曲江波;常青;刘长琳;葛建龙

单位：

上海海洋大学水产与生命学院;中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室;烟台开发区天源水产有限公司

关键词：

中华蛸;vasa;基因克隆;表达分析

摘要：

vasa基因编码的蛋白是DEAD-box(Asp-Glu-Ala-Asp)蛋白家族成员,对真核生物生殖细胞的形成具有关键作用.本研究使用cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆了中华蛸(Octopus sinensis)vasa基因全长,共2438bp,其中,开放阅读框长2067bp,编码688个氨基酸,5'-UTR长128bp,3'-UTR 长 244 bp(包含 A 尾巴).基于 ExPASy、Signal 4.1、TMHMM、SMART 等在线软件对 Os-vasa基因的蛋白质结构进行预测,得出其氨基酸分子量为76 580.53 Da,理论等电点为5.89.无信号肽,跨膜区域没有明显的信号,因此,推测其为胞内蛋白,不属于膜蛋白.该蛋白具有DEXDc和HELICc 2个功能结构域,而且有9个DEAD-box家族蛋白的典型保守区域,表明所得cDNA属于vasa基因家族.使用qRT-PCR对中华蛸各时期胚胎、初孵幼体及2个发育时期的卵巢及雌雄不同组织的表达模式进行分析.结果显示,Os-vasa基因在性腺中特异性表达,且在卵巢中的表达大于精巢,未成熟和成熟卵巢中均有vasa mRNA表达,且未成熟期表达量较高.因此,推测Os-vasa基因可能在卵巢发育过程和功能维持等方面起到重要作用.在中华蛸早期胚胎发育阶段,均能检测到Os-vasa基因转录本,前10 d微弱表达,从第13天开始,表达量逐渐上升,至第19天达到最高.在初孵幼体阶段,Os-vasa分别在第8天和第20天出现最低和最高表达量.本研究结果可为中华蛸原始生殖细胞起源、迁移和分化提供理论资料,有助于加深对中华蛸卵巢发育和卵子发生过程的理解.

译名：

Cloning and Expression of the vasa Gene in the Octopus sinensis

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