孙宇;王宁;高崇;周晗;姜艳平;崔文;乔薪瑗;唐丽杰;徐义刚;王丽;李一经

东北农业大学动物医学学院

猪源噬菌体抗体库;传染性胃肠炎病毒;单链抗体;噬菌体展示系统;

为了获得猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的单链抗体,首先利用噬菌体展示技术,构建猪源噬菌体单链抗体库,然后,通过微孔板筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,并用ELISA检测单链抗体与TGEV的亲和力,对亲和性较高的单链抗体进行基因测序与分析。结果表明,成功构建了猪源噬菌体单链抗体库,其库容为1.89×10⁷CFU/mL,通过Phage ELISA和Fab ELISA筛选得到4株与TGEV具有高亲和力的单链抗体,并通过桑格测序获得了与TGEV亲和性最佳的2株抗体的基因序列。利用在线生物信息学工具对所获得的抗体基因序列进行分析,结果表明,这2株单链抗体基因序列分别由猪源IgG的重链可变区基因（V_H）和κ型轻链可变区基因（V_L）构成,V_H和V_L均由3个CDR区和4个FR区构成,说明上述基因序列为完整的猪源TGEV抗体可变区。本研究的结果将为TGEV抗体药物的开发提供必要材料,为TGEV感染仔猪的临床治疗提供新的思路。