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Animal Husbandry & Veterinary Medicine
2018
(8)
基于CRISPR/Cas9敲除技术研究Gata4基因在雄性小鼠睾丸发育中的功能
作 者：
郭善军;李晶;王澍弘;王顺德
关键词：
Gata4;CRISPR/Cas9;基因敲除;精子生成;生殖发育
摘 要：
旨在通过CRISPR/Cas9技术研究Gata4基因在雄性小鼠睾丸中的作用机制.试验以C57BL/6小鼠为模型,通过CRISPR/Cas9技术在雄性小鼠体内敲除Gata4基因,组织学观察睾丸形态学变化,ELISA法测定雄激素相关合成酶,实时定量PCR检测相关标记基因.利用CRISPR/Cas9技术成功在小鼠体内敲除Gata4基因,通过PCR扩增、酶切计算得到基因敲除率93%;在2月龄小鼠性成熟时,通过定量PCR、HE染色和ELISA检测发现,与对照组相比,敲除组小鼠睾丸发育迟缓,明显变小,精原细胞和精子生成减少,睾丸中雄性信号通路相关基因(Stra8,Vasa,Dazl,Tnp1,Spo11,Sox9,17HSDb3,Dmrt1)表达量降低,雄激素水平显著降低.研究表明,Gata4在雄性小鼠生殖器官发育与精子生成过程中具有重要功能.
单 位：
GUO Shanjun%LI Jing%WANG Shuhong%WANG Shunde%Dazhou Vocational and Technical College%Chongqing Three Gorges Central Hospital
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