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当前位置: 首页 > 文章 > 中国水仙REMAP反应体系的建立和优化 安徽农业大学学报 2013,40 (2) 128-131
Position: Home > Articles > Establishment and optimization of REMAP system in Chinese narcissus Journal of Anhui Agricultural University 2013,40 (2) 128-131

中国水仙REMAP反应体系的建立和优化

作  者：
林晓红;潘东明
单  位：
漳州城市职业学院;福建农林大学园艺学院
关键词：
中国水仙;金盏;REMAP;体系建立;优化
摘  要：
对影响中国水仙"金盏"品种的REMAP-PCR扩增反应的各个参数进行优化,建立适合中国水仙的REMAP反应体系20μL,包括如下成分:模板DNA 40 ng、dNTPs 0.2 mmol.L-1、引物0.45μmol.L-1、Taq酶1U和10×Buffer(含Mg2+)2μL。扩增程序为反应程序:94℃预变性4 min;94℃变性40 s,55℃退火40 s;72℃延伸90 s,共35个循环;最后72℃延伸10 min,4℃保存。该反应体系标记点位清晰、稳定、重复性好,适宜中国水仙的REMAP分析,为应用REMAP技术鉴定中国水仙种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础。
译  名：
Establishment and optimization of REMAP system in Chinese narcissus
作  者：
LIN Xiao-hong1,2,3,PAN Dong-ming2,3(1.Zhangzhou City College,Zhangzhou 363000;2.College of Horticulture,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002;3.Institute of Storage Science and Technology of Horticultural Products,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002)
关键词：
Chinese narcissus;Jinzhan;REMAP;establishment of system;optimization
摘  要：
Factors affecting REMAP-PCR application of Chinese narcissu Jinzhan were optimized in this study,and REMAP system for Chinese narcissus was established.Each 20 μL amplification reaction consisted of DNA 40 ng,10×Buffer including Mg2+2 μL,REMAP primer(10 μmol.L-1) 0.45 μmol.L-1,dNTP(10 mmol.L-1) 0.2 mmol.L-1,Ex Taq polymerase(5 U.μL-1)1 U.Amplication was under the following conditions: 4 min at 94℃ for 1cycle,followed by 40 s at 94℃,40 s at 55℃,and 90 s at 72℃ for 35 cycles,then 7 min at 72℃ for a final extension.The clear,stable and reproducible optimal REMAP-PCR reaction system was established for RPMAP analysis of Chinese narcissus,which would lay a good foundation for REMAP analysis on Chinese narcissus resource identification,molecular marker assisted breeding and genetic diversity.

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