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苹果抗寒矮化砧MdAP2D67.1基因的克隆和低温响应表达分析

作  者:
王海波;王传增;李林光;常源升;王森;高文胜;何晓文;何平
单  位:
山东省果茶技术推广站;山东省果树研究所山东省苹果遗传育种和栽培工程实验室
关键词:
苹果矮化砧;AP2/ERF转录因子;基因克隆;低温胁迫;基因表达;
摘  要:
AP2/ERF是植物特有的转录因子,在各种胁迫响应中发挥至关重要的调控作用。本研究在前期苹果抗寒矮化砧木‘71-3-150’转录组中分离出1个AP2/ERF基因,克隆其cDNA全长并进行序列分析。结果表明,该基因编码蛋白含有AP2家族DNA结合结构域,与拟南芥AT2G28550同源,且与‘富士’苹果MdAP2D67相似性最高,将其命名为MdAP2D67.1 (GenBank登录号:MT976146)。该基因开放阅读框长度1 392 bp,编码463个氨基酸。MdAP2D67.1蛋白分子量为50.87 kD,等电点为6.74,该蛋白序列不含有信号肽和转运肽,不存在跨膜结构域,初步预测定位于细胞核中。利用实时荧光定量PCR技术分析表明MdAP2D67.1可被低温诱导表达,在‘71-3-150’韧皮部、叶芽、花芽中的表达量均高于抗寒性较弱的‘M9T337’,表明该基因与苹果矮化砧抗寒性密切相关。

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