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四川地区养殖鲫鲤疱疹病毒Ⅱ型的鉴定及病理学研究

作  者:
周瑶佳;田思璐;许佳雪;李尹麒;杨悦;耿毅;黄小丽;陈德芳;汪开毓;欧阳萍
单  位:
四川农业大学动物医学院; 四川农业大学动物科技学院
关键词:
鲫;鲤疱疹病毒Ⅱ型;组织病理;超微病理
摘  要:
为探究疾病病因和流行特点,对患病鲫进行剖检、病理学观察、分子生物学检测及人工感染实验.结果显示,患病鲫临床表现为离群独游、浮头、全身发黑及体表出血等.剖检发现鳃、肝脏、肾脏等器官出血、肿胀和坏死,鳔点状出血.组织病理观察显示,鳃呼吸上皮细胞肿胀、坏死及脱落;肾脏局灶性坏死;脾脏组织广泛变性坏死,造血系统崩解;肝脏发生空泡变性和坏死.透射电镜观察到脾脏和肾脏中存在4种大小不同的病毒颗粒,分别为DNA病毒内核、空衣壳、实心衣壳和有包膜的成熟病毒粒子.未成熟的病毒粒子存在于细胞核,成熟的病毒粒子存在于细胞质.电镜下可见鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)在细胞核内完成核酸复制和核衣壳装配,囊膜蛋白在出核后获得.细胞核萎缩、核染色质边缘化,线粒体肿胀、坏死、嵴断裂,细胞质空泡化.取患病鲫组织匀浆滤菌后接种到鲤上皮瘤细胞系(epithelioma papulosum cyprinid cell line,EPC)和胖头鲤肌肉细胞系(fathead minnow cell line, FHM),盲传3代后未见细胞病变.通过腹腔注射患病鲫组织匀浆进行人工感染实验,实验组鲫表现出与自然感染鲫相同的临床症状,对照组鲫正常,实验组累积死亡率为80%.用PCR方法检测CyHV-2的解旋酶基因片段,扩增出预期大小相符的目的条带.利用邻近法对该病毒的解旋酶基因进行系统发育分析,结果显示与CyHV-2(YZ-01)的同源性为99%.以上实验结果证实了CyHV-2是导致这次疾病暴发的原因.

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